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地址:北京市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)涼水河一街7號院亦莊國際生物醫(yī)藥園一區(qū)2號樓
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首頁 > 移植配型及相關(guān) > one Lambda產(chǎn)品
美國One Lambda公司是HLA領(lǐng)域中歷史最久、規(guī)模最大、技術(shù)力量最雄厚的企業(yè),主要產(chǎn)品包括:單克隆抗體配型試劑、HLA單抗干板、DNA檢測試劑盒、PRA檢測試劑盒和HLA領(lǐng)域各種專用儀器、試劑、磁珠、計算機(jī)分析軟件等。近年來One Lambda公司與中國的交流不斷加深,目前在中國器官移植領(lǐng)域建立了多個合作實(shí)驗(yàn)室,并同HLA領(lǐng)域的專家、技術(shù)人員建立了廣泛的聯(lián)系。有CFDA認(rèn)證。
淋巴毒檢測
產(chǎn)品原理
早在1956年Dr.Gorer等創(chuàng)建的補(bǔ)體依賴的淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)檢測方法,用于檢測小鼠同體抗體。1964年美國UCLA Dr.Terasaki等將此方法幾經(jīng)改良,并使之微量化后應(yīng)用到HLA血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)中。本方法操作簡便,結(jié)果可靠,重復(fù)性好,從方法學(xué)上為HLA的血清學(xué)研究敞開了大門。此方法沿用至今,成為一項被美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)認(rèn)可的國際通用的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù),稱之為“標(biāo)準(zhǔn)血清學(xué)分型方法(standard serology)”。HLA細(xì)胞毒抗體屬于免疫球蛋白IgG和IgM類型的抗體。此抗體在補(bǔ)體存在的情況下,能夠結(jié)合到帶有相應(yīng)抗原的活淋巴細(xì)胞膜表面上,可以用數(shù)種方法觀察此結(jié)果,其中最簡單的方法是采用染色法(常用伊紅或錐藍(lán))。染料進(jìn)入死細(xì)胞后使死細(xì)胞體積增大并著色稱為陽性結(jié)果,而活細(xì)胞不被著色成為陰性結(jié)果。一般根據(jù)死亡細(xì)胞占全部檢測細(xì)胞的百分比的試驗(yàn)結(jié)果,來判斷抗體與抗原反應(yīng)的強(qiáng)度。


操作說明:
淋巴毒實(shí)驗(yàn)操作步驟
細(xì)胞分離:
1、取2ml供者的抗凝血(抗凝劑最好選擇枸櫞酸鈉即ACD)。
2、用淋巴細(xì)胞分離液(國產(chǎn)、進(jìn)口均可)或熒光免疫磁珠(ONE LAMBDA)。
3、 分離細(xì)胞后用McCoy s液或RPMI1640培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,細(xì)胞數(shù)為:大約2000/ml。
血清制備:
4、 無抗凝液的試管取受者5ml血。
5、 用水平式離心機(jī)離心2000rpm,10分鐘,收集血清。
補(bǔ)體制備:
6、 將ONE LAMBDA公司的一類補(bǔ)體,用無菌水(4℃冷藏后最佳)溶解。
7、 完全溶解后分裝(10-20ul/管),備用。注:這里只是ONE LAMBDA公司的補(bǔ)體效價結(jié)果,如使用其他補(bǔ)體不能保證結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)步驟:
8、 準(zhǔn)備一塊TERASAKI空板。
9、 取供者細(xì)胞1ul,受者血清1ul,OLI補(bǔ)體1ul及5ul礦物油,分別加入空板孔中,加蓋放入37℃水浴箱中孵育,1個小時。
10、1小時后取出反應(yīng)板,在反應(yīng)孔中再加入5ul胎盤藍(lán)染液,加蓋放入37℃水浴箱中孵育,1個小時。
11、1小時后顯微鏡下數(shù)細(xì)胞。
12、熒光免疫磁珠提取的細(xì)胞使用熒光終止劑5ul,加入終止劑后即可鏡下觀察,或放置數(shù)小時后觀察均可。判定分?jǐn)?shù)以NIH方法為準(zhǔn),按死細(xì)胞所占比例來定,1分陰性死細(xì)胞占1-10%,2分陰性死細(xì)胞占11-20%,4分陰性/陽性死細(xì)胞占21-50%,6分陽性死細(xì)胞占51-80%,8分陽性死細(xì)胞占81-100%。
結(jié)果判定:
顯微鏡下死細(xì)胞呈蘭色狀,活細(xì)胞為白色發(fā)亮,鏡下用細(xì)胞計數(shù)器記數(shù),算出死細(xì)胞與活細(xì)胞的比例,以百分比計算,其中10%以下為陰性可進(jìn)行器官移植(腎臟、心臟、肝臟等),10%以上為陽性不能進(jìn)行器官移植。
訂購信息:
| 產(chǎn)品目錄 | 產(chǎn)品說明 | 規(guī)格 |
| 兔補(bǔ)體和陽性質(zhì)控血清 | ||
| CABC-1D | 凍干一類補(bǔ)體--1ml | 1ml/瓶 |
| CDR-1D | 凍干二類補(bǔ)體--1ml | 1ml/瓶 |
| ALSG | 抗淋巴細(xì)胞陽性質(zhì)控血清 | 1ml/瓶 |
| IGg | IGg抗體 | 25人份/支 |
| 干燥淋巴細(xì)胞分離劑 | ||
| LK-50-MN | 單核細(xì)胞分離劑 | 瓶 |
| LK-50-T | B淋巴細(xì)胞分離劑 | 瓶 |
| LK-50-B | T淋巴細(xì)胞分離劑 | 瓶 |
| LKTB25 | T/B淋巴細(xì)胞分離劑 | 瓶 |
| LKT25 | 淋巴細(xì)胞分離劑 | 瓶 |
| 免疫熒光磁珠分離劑 | ||
| FB1-25 | 免疫磁珠T細(xì)胞分離劑-2.5ml | 2.5ml/瓶 |
| FB1-100 | 免疫磁珠T細(xì)胞分離劑-10ml | 10ml/瓶 |
| FB1-DEV | 免疫磁珠T細(xì)胞顯影劑- 22ml | 22ml/瓶 |
| FB2-25 | 免疫磁珠B細(xì)胞分離劑-2.5ml | 2.5ml/瓶 |
| FB2-100 | 免疫磁珠B細(xì)胞分離劑-10ml | 10ml/瓶 |
| FBA-MAG2+2 | 4孔磁性分離試管架 | 個 |
| FBA-MAG6+6 | 12孔磁性分離試管架 | 個 |
| PC1-500 | 沖洗磁珠用緩沖液 | 500ml/瓶 |
| 反應(yīng)終止劑 | ||
| SF-500 | 一步法終止劑-500ml | 500ml/瓶 |
| SF-2000 | 一步法終止劑-2000ml | 2000ml/瓶 |
| FQAE100 | 一步法熒光終止劑-100ml | 100ml/瓶 |
| FQAE500 | 一步法熒光終止劑-500ml | 500ml/瓶 |
| FQAE2000 | 一步法熒光終止劑-2000ml | 2000ml/瓶 |
| 泰薩奇板密封片 | ||
| TIS-250 | 密封片(每箱250) | 250片/箱 |
| TIS-1000 | 密封片(每箱1000) | 1000片/箱 |
| TFS-250 | 熒光密封片(每箱250) | 250片/箱 |
| TFS-1000 | 熒光密封片(每箱1000) | 1000片/箱 |
| 72孔泰薩奇板 | ||
| TH72-100 | 72孔泰薩奇板(100塊) | 100塊/箱 |
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