BRAF基因突變檢測(cè)試劑盒

 

【產(chǎn)品介紹】

BRAF基因突變?cè)诖蠹s15%的癌癥中發(fā)現(xiàn)，包括甲狀腺癌、惡性黑色素瘤、大腸癌等，是新的基因治療靶點(diǎn)，并于預(yù)后緊密相關(guān)。BRAF基因編碼的絲/蘇氨酸特異性激酶，是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路的重要轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，參與調(diào)控細(xì)胞的分化凋亡等。

BRAF突變主要有兩種類型，發(fā)生在exon11上的甘氨酸環(huán)或exon15的激活區(qū)。Exon15的突變約有90%是V600E突變，1799位堿基由T變成了A。BRAF V600E突變?cè)诩s45%的甲狀腺乳頭狀癌被檢出，在結(jié)直腸癌個(gè)BRAF的突變率約在15%，90%以上是V600E突變。此外，BRAF基因突變是惡性黑色素瘤和結(jié)直腸癌預(yù)后不良的重要因素有關(guān)，是結(jié)直腸癌藥物（如西妥昔單抗）的藥物反應(yīng)標(biāo)志. BRAF基因突變檢測(cè)對(duì)于大腸癌和甲狀腺癌診斷和預(yù)后的藥物反應(yīng)是必要的。

 

【檢測(cè)原理】

PNA Clamp™ BRAF突變檢測(cè)試劑盒是基于PNA的實(shí)時(shí)PCR Clamp™技術(shù)。該技術(shù)依賴PNA探針的兩個(gè)重要特性。第一，PNA只能與完全配對(duì)的互補(bǔ)DNA鏈雜交。只要出現(xiàn)突變，即使是單一堿基錯(cuò)配，PNA就不能與互補(bǔ)的DNA鏈結(jié)合。第二，PNA的寡聚體本身不能被DNA聚合酶識(shí)別，從而不會(huì)充當(dāng)PCR引物。它僅作為一個(gè)序列選擇工具，阻止隨后野生型的PCR擴(kuò)增。

如果模板中目的基因發(fā)生了突變并因此出現(xiàn)了錯(cuò)配，使得DNA/PNA雙鏈結(jié)合不穩(wěn)定，這樣DNA模板鏈就可以正常擴(kuò)增，使發(fā)生突變的樣本在實(shí)時(shí)PCR中得到陽性擴(kuò)增產(chǎn)物，而野生型基因的擴(kuò)增受到抑制。

 

 

【適用樣本】

     Ø石蠟包埋組織樣本  

        

         Ø胸腔積液

 

         Ø新鮮血漿

           

    Ø細(xì)胞學(xué)樣本

 

         Ø新鮮組織活體組織切片

 

【實(shí)驗(yàn)流程】

 

 【儀器要求】                                                          

公司 型號(hào) Bio-Rad  CFX 96 Roche Light cycler 480Ⅱ Qiagen Rotor-Gene Q ABI ABI7500 ABI ABI7900

 

 【技術(shù)特點(diǎn)】

Ø操作簡(jiǎn)便快捷——通過實(shí)時(shí)熒光PCR+PNA Clamp技術(shù)，2h即可獲得多達(dá)數(shù)十個(gè)樣本的檢測(cè)結(jié)果。

 

Ø專利技術(shù)——采用PANAGENE公司先進(jìn)的PNA Clamp技術(shù)，檢測(cè)效果優(yōu)于傳統(tǒng)測(cè)序法和ARMS法等。

 

Ø靈敏度高——能測(cè)出0.1-1%的DNA突變。

 

Ø選擇性好——可在混有野生型基因組DNA情況下，檢測(cè)出1-0.1％的突變基因，是測(cè)序方法的25倍-250倍。

 

【訂購信息】  

產(chǎn)品名稱	貨號(hào)		規(guī)格
BRAF突變檢測(cè)試劑盒	PNAC-2001		50Tests/盒

 【參考文獻(xiàn)】

1. Choi et al., Frequency of KRAS, BRAF, and PIK3CA mutations in advanced colorectal cancers: Comparison of peptide nucleic acid-mediated PCR and direct sequencing in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue. Pathol Res Pract 207 (12):762-8, 2011.

2. Yoon et al., K-ras Gene Mutation in Non-Small Cell Lung Cancer. J Lung Cancer 1(1):55-59, 2002.

3. Beau-Faller et al., Detection of K-Ras mutations in tumour samples of patients with non-small cell lung cancer using PNA-mediated PCR clamping. British Journal of Cancer 100(6): 985 – 992, 2009.

4. Chang et al., Fast simultaneous detection of K-RAS mutations in colorectal cancer. BMC cancer 9:179, 2009.

5. Dabritz et al., Detection of Ki-ras mutations in tissue and plasma samples of patients with pancreatic cancer using PNA-mediated PCR clamping and hybridisation probes. British Journal of Cancer 92(2): 405-412, 2005.

6. Behn et al., Facilitated detection of oncogene mutations from exfoliated tissue material by a PNA-mediated `enriched PCR' protocol. J. Pathol 190(1):69-75, 2000.

7. Hilger et al., The Ras-Raf-MEK-ERK Pathway in the Treatment of Cancer. Onkologie 25(6): 511-518, 2002.

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